Fosfolipásica

CONIC 2003

Marcussi, S(1); Mazzi, MV(3); Fernandes, VC(1); Sant'Ana, CD(3); Ticli, FK(3); França, SC(1); Giglio, JR(2); Soares, AM(1)

Inibição de PLA2s isoladas de veneno de serpente Bothrops jararacussu, por substâncias naturais e artificiais.

O grande interesse médico-científico despertado pelo envolvimento destas proteínas em diferentes processos fisiopatológicos levou a uma crescente busca por ligação destas com inibidores, substratos naturais e artificiais, visando sua neutralização. Este trabalho tem por objetivo verificar o efeito inibitório de diferentes substâncias sobre as PLA_2s de B. jararacussu. Três PLA_2s (BthTX-I, Lys49; BthTX-II, Asp49; e BthA-I-PLA2s, Asp49) foram isoladas do veneno de Bothrops jararacussu e testadas contra diferentes inibidores naturais e artificiais. Estudos de mecanismos de ação foram desenvolvidos através de ensaios com diferentes inibidores sintéticos (EDTA, BPB, manoalide B) e naturais (heparina, BmjMIP, manoalide A). A modificação química induzida pelo BPB resultou em inibição total das atividades, fosfolipásica e anticoagulante, induzidas pelas BthTX-II e BthA-I-PLA2. As atividades de ruptura de lipossomos e edema induzidas pelas Asp49 foram parcialmente inibidas, assim como os efeitos miotóxico, citotóxico e indução de edema causados pela BthTX-I. A interação com BPB também alterou o efeito das Asp49 sobre plaquetas, da BthA-I-PL_A2 sobre a pressão arterial e das BthTX-I e II em induzir letalidade. A incubação com EDTA resultou em inibição total da atividade fosfolipásica das Asp49, diminuindo os efeitos de ruptura de lipossomos, miotoxicidade, citotoxicidade e edematogênico da BthTX-II, e de ruptura de lipossomos da BthA-I-PL_A2. A heparina, BmjMIP e os Manoalide A e B também inibiram a citotoxicidade, a miotoxicidade, o edema e a ruptura de liposssomos, em diferentes intensidades, agindo particularmente sobre o efeito de cada proteína. As PLA₂ de venenos são algumas das substâncias naturais com atividades farmacológicas de interesse médico-científico que têm sido amplamente pesquisadas.

Amui, SF(1); Marcussi, S(2); Urzêda, MA(3); Silveira, LB(3); Coelho, MFB(4); Pereira, AMS(3); França, SC(3); Soares, AM(1)

Jatropha elliptica (Pohl.) Muell. Arg., uma planta herbácea-subarbustiva da família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como “batata de tiu, jalapão, raiz de cobra, e tiu”, é uma espécie característica dos cerrados brasileiros muito utilizada na medicina popular como depurativo do sangue, no tratamento de sífilis e em envenenamentos ofídicos, entre outras utilizações (Pio Corrêa, 1984; Van Den Berg & Silva, 1988). Jatropha elliptica foi selecionada para este estudo por apresentar atividade antiofídica de uso preconizado na medicina popular na região do Brasil Central (Silva, 1998). O uso de extratos de plantas como antídoto para venenos de serpentes é uma antiga opção utilizada em muitas comunidades que não têm acesso à soroterapia, podendo ser um substituto alternativo e/ou complementar. Acidentes com animais peçonhentos constituem um problema de saúde pública, tanto pela freqüência com que ocorrem, quanto pela gravidade de muitos deles (Ribeiro, 1990). No Brasil ocorrem entre 19 a 22 mil casos de acidentes ofídicos por ano, dos quais 90,5% são causados por serpentes do gênero Bothrops (Pinho e Pereira, 2001). Diversas espécies vegetais tem sido descritas como antiofídicas e alguns princípios ativos foram isolados e caracterizados, como por exemplo, de Eclipta prostata, Tabernaemontana catharinensis, Casearia sylvestris, Mandevilla velutina, Sapindus sapindus e Cordia verbenacea.

Cambraia, RS(1); Malosso, MG(1); Marcussi, S(1,2); Fernandes, VC(1); Sant`Ana, CD(1, 3); Pereira, AMS(1); Giglio, JR(2); Soares, AM(1,3)

Propriedades antiofídicas do extrato aquoso de Jacaranda decurrens

Segundo dados da Organização Mundial de Saúde (OMS), de 65 a 80 % da população dos países pobres recorrem ao uso de plantas medicinais para o tratamento de seus males. Algumas plantas brasileiras têm sido utilizadas como antiofídicas na medicina popular. Entretanto, poucas são as espécies que têm sido investigadas cientificamente, e ainda menor é o número de seus componentes ativos isolados e caracterizados estrutural e funcionalmente. As raízes da planta Jacaranda decurrens, conhecida popularmante como "Carobinha", são muito indicadas como antiinflamatório, depurativo tônico e cura de ferimentos. Este trabalho avaliou os efeitos antiofídicos do extrato aquoso de J. decurrens sobre diferentes atividades induzidas por venenos de serpentes de várias espécies. O extrato aquoso foi incubado com os venenos por 30min a 37ºC em diferentes proporções e em seguida submetidos aos ensaios. A inibição da atividade fosfolipásica (enzimática) foi medida em gel de agarose suplementado com gema de ovo e eritrócitos humanos. Amostras de venenos e extrato previamente incubadas foram submetidas à eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) para observar a presença ou não de proteólise das proteínas dos venenos pela ação do extrato. A atividade hemorrágica foi realizada por injeção intra-dérmica no dorso de camundongos seguida por medida dos halos hemorrágicos (cm). A indução de edema foi realizada por injeção sub-plantar em camundongos e medida das patas, com paquímetro de baixa pressão. O extrato inibiu parcialmente a atividade fosfolipásica dos venenos das serpentes Crotalus durissus terrificus, Bothrops alternatus e B. moojeni. A hemorragia induzida por B. jararacussu, B. alternatus e B. neuwiedi foi parcialmente inibida pelo extrato na proporção de 1:50 (m/m). A SDS-PAGE mostrou a integridade das proteínas dos venenos após incubação com o extrato nesta mesma proporção. O edema induzido por diferentes venenos foi parcialmente inibido pelo extrato, nos diferentes tempos medidos e concentrações utilizadas. As plantas medicinais constituem uma rica fonte de inibidores naturais de toxinas animais e o extrato desta planta exibe eficientes inibidores de proteases e fosfolipases A2 de venenos de serpentes.

XII Congresso de Iniciação Científica da Universidade Federal de São Carlos - UFSCar